ระยะเวลาที่มีผลต่อความคงตัวของสารเรืองแสงในการย้อมเซลล์ที่ถูกตรึง เพื่อวิเคราะห์ด้วยเทคนิค Flow Cytometry

Abstract

ปัจจัยหน่ึงท่ีทา ให้งานบริการตรวจวิเคราะห์เซลล์ด้วยเทคนิค flow cytometry ประสบความส าเร็จคือ ระยะเวลาท่เีหมาะสมต่อสภาพความคงตัว (stability) ของสารเรืองแสงท่ใีช้เพ่ือให้ทราบถึงผลของปัจจัยดังกล่าว ผู้วิจัยได้ตรวจนับจา นวนเซลล์และปริมาณความเข้มจากการคายแสงของสารฟลูออเรสเซนต์ของเซลล์ท่ถีูกตรึง และ ย้อมด้วย propidium iodide (PI) และแอนติบอดี (antibody) ท่ีจา เพาะกับเซลล์ท่ีติดฉลากด้วย fluorescein isothiocyanate (FITC), phycoerythrin (PE) และ PE-Cy7 งานวิจัยได้แบ่งการทดลองเป็น 2 กลุ่มคือ เซลล์ เนื้อเยื่อสัตว์ (เซลล์ MCF-7, เซลล์ HuCCA-1 และเซลล์ HT1080) และเซลล์เม็ดเลือดขาว (granulocytes (CD11b), monocytes (CD14) และ lymphocytes (CD4:CD8 และCD3:CD19)) ถูกวิเคราะห์ด้วยเครื่อง BD FACSCanto flow cytometer ตามระยะเวลา 0, 15, 30 นาที; 1, 2, 3, 5 ชั่วโมง; 1, 2, 3, 4, 5 และ 7 วัน ผลการ วิเคราะห์โดยพิจารณาจากค่า mean differences ท่ี3% ซ่ึงแสดงถงึความคงตวัของสารเรืองแสงท่ยีอมรับได้พบว่าใน เซลล์เนื้อเยื่อสัตว์มีค่า mean differences ของจา นวนเซลล์และปริมาณความเข้มแสงมากกว่า 3% ต้งัแต่วันท่ี3 เป็น ต้นไป ในขณะท่เีซลล์เมด็เลือดขาวมคี่า mean differences ของจา นวนเซลล์มากกว่า 3% ต้งัแต่วันท่ี5 เป็นต้นไป แต่ ค่า mean differences ของปริมาณความเข้มแสงไม่แตกต่างกันอย่างชัดเจน ข้อมูลดังกล่าวบ่งช้ีถึงระยะเวลาท่ี เหมาะสมต่อการส่งตัวอย่างเซลล์เนื้อเยื่อสัตว์ และเซลล์เม็ดเลือดขาวเพื่อการวิเคราะห์ในงานวิจัยของผู้รับบริการไม่ ควรเกิน 3 วัน และ 5 วันตามล าดับ จากข้อมูลเบื้องต้นยังสามารถใช้ในการจัดตารางเวลาในการเข้ารับบริการได้ อย่างมีประสิทธิภาพต่อไป